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EGE技术基因敲入细胞系

2017-07-14 10:30:48.0

百奥赛图利用EGE技术,成功制备了在ACTB(细胞骨架丝状蛋白)基因编码框翻译起始位点敲进EGFP(融合蛋白)的U2OS细胞系,以及在LMNB1(核膜蛋白)基因编码框起始位点敲进EGFP(融合蛋白)的大鼠C6细胞系。


平台优势

高速度:最快2-3个月得到阳性单克隆细胞系

零风险:强大的细胞基因编辑平台,课题失败全额退款

高效率: 利用EGE技术,比传统的CRISPR/Cas9介导基因重组技术效率提高20倍

更安全:与病毒感染相比安全性更高

经验丰富:已经完成数百个EGE®细胞系课题的制备经验

细胞来源可靠:野生型细胞系来源于ATCC


成功案例

打靶载体设计及荧光检测结果

利用流式细胞术分析重组效率发现,在U2OS细胞系中,CRISPR/Cas9介导的EGFP-ACTB基因敲进效率只有1.91%,而EGE®可以达到15.02%,提高了约8倍。在C6细胞系中,EGE®技术将EGFP-LMNB1的敲进效率从0.19%提升至3.6%,提高了约19倍。

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图1. ACTB 基因编码β-ACTIN蛋白,它是一种细胞骨架蛋白。打靶载体同源臂约为1kb,分别利用CRISPR/Cas9和EGE®技术介导打靶载体的同源重组。

图2. LMNB1基因编码核蛋白Lamin-B1。打靶载体同源臂约为1kb,分别利用CRISPR/Cas9和和EGE®技术介导同源重组。



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