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B-NDG®(B-NSGTM)小鼠 B-NDG®(B-NSGTM)mice)

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B-NDG®(B-NSGTM) 小鼠 (B-NDG®(B-NSGTM) mice)

B:Biocytogen;  N:NOD background;  D:DNAPK(Prkdc)null;G:IL2rg knockout.

NOD-Prkdcscid Il2rgtm1/Bcgen

B-NDG®(B-NSGTM) 小鼠是NOD-scid遗传背景、将IL2rg基因敲除的小鼠,是目前国际公认的免疫缺陷程度高、适合人源细胞或组织移植的工具小鼠。

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基本特征

• NOD-scid(non-obese diabetes, severe combined immunedeficiency)遗传背景:NOD背景小鼠的Prkdc(protein kinase DNA-activated catalytic)基因突变,缺失功能性T、B细胞及补体系统,NK细胞功能减弱。

• Prkdc(scid):Prkdc(protein kinase, DNA activated, catalytic polypeptide)基因突变,小鼠的功能性T和B细胞缺失,淋巴细胞减少,表现为细胞免疫和体液免疫的重度联合免疫缺陷(severe combined immune deficiency, scid)。

• IL2rgnull: Interleukin-2受体的gamma链(IL-2R γc,又称CD132)位于小鼠X染色体上,是具有重要免疫功能的细胞因子IL2、IL-4、IL-7、IL-9、IL-15和IL-21的共同受体亚基,该基因敲除后的小鼠机体免疫功能严重降低,尤其是NK细胞的活性几乎丧失。

B-NDG®(B-NSGTM) 小鼠:综合了NOD-scid-IL2rgnull背景特征,具有重度免疫缺陷表型,无成熟T细胞、B细胞和功能性NK细胞,细胞因子信号传递能力缺失等,非常适合人造血干细胞及外周血单核细胞的移植和生长。

 

优点

主要应用领域

•世界公认的重度免疫缺陷小鼠;

• 人源细胞或组织移植

• 与NOD-scid小鼠相比寿命更长,平均长达1.5年;

• 对人源细胞和组织几乎没有排斥反应;

• 肿瘤和肿瘤干细胞研究

•  ES和iPS细胞研究

• 少量细胞即可成瘤,依赖于细胞系或细胞类型;

• 造血和免疫学研究

• 无B淋巴细胞泄漏。

• 人类疾病感染模型研究

初步表型分析

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图1.  B-NDG®(B-NSGTM) 小鼠的T 、B和NK细胞的完全缺失。

C57BL/6、BALB/c、NOD-scidB-NDG®(B-NSGTM) 小鼠脾脏细胞的脾脏细胞,并通过流式对比其中T 、B和NK细胞的组成(A)并进行统计对比(B)

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图2.人外周血细胞(hPBMCs, human pripheral blood mononuclear cells) 在B-NDG®(B-NSGTM) 小鼠的成功接种。

 

通过尾静脉注射5x106人外周血细胞(hPBMCs)进B-NDG®(B-NSGTM) 小鼠,24天后取血流式检测hCD45+mCD45+的比例,3只B-NDG®(B-NSGTM) 小鼠都取得了相似的结果。

 

  

                                                                                

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图3.  Raji淋巴肿瘤细胞在B-NDG®(B-NSGTM) 小鼠上能更有效地建立系统和转移肿瘤模型。

     B-NDG®(B-NSGTM)NOD-scid、BALB/c nude小鼠通过尾静脉注射相同数量( 5 × 105)的Raji细胞,后在不同的时间点记录并分析小鼠的如下各种指标。

A.细胞接种后记录小鼠生存情况,绘制Kaplan-Merier生存曲线。

B.细胞接种后每周小鼠体重变化(g),并计算出相对于接种当天的相对体重。

C.小鼠外周血中人源细胞百分率变化。接种Raji细胞后,每周通过眼眶静脉丛采取100 μl全血,提取DNA,通过q-PCR技术检测小鼠外周血中人源细胞比率。

D.接种Raji细胞后小鼠肝脏对比。接种后待小鼠体重下降超过20%后执行安乐死并解剖脏器,进行拍照。

E.接种Raji细胞后小鼠脏器免疫组化染色。接种后待小鼠体重下降超过20%后执行安乐死,解剖小鼠,将肝脏和脾脏包埋成蜡块,进行免疫组化。一抗为鼠抗人线粒体膜蛋白抗体(Millipore,MAB1273);放大倍数400倍。

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图4:B-NDG®(B-NSGTM) 鼠与CB17-scid 鼠比较有更好的建模优势。

A 病人胃癌样品在B-NDG®(B-NSGTM) 小鼠皮下接种并成瘤。

B 病人胃癌样品在B-NDG®(B-NSGTM) 小鼠体内的肿瘤生长曲线。

C 病人胃癌样品在CB17-scid B-B-NDG®(B-NSGTM) 小鼠体内的成瘤率比较。


B-NDG小鼠说明书.pdf



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